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脂肪酶是一种水解长链脂肪酸甘油酯的酶，血清中的脂肪酶主要来自于胰腺，也有一些来自于其他组织，如胃，小肠黏膜，肺等处者;此外，在白细胞，脂肪细胞，乳汁中也可测到脂肪酶活性。脂肪酶可由肾小球滤过，并被肾小管全部回吸收，所以尿中测不到脂肪酶活性。
参考值：BMD浊度法(30℃)：成人：30～109U/I.
>60岁：18～180U/L.
滴定法：0～0.7U/ml 1.5U以上有意义。
血清脂肪酶活性测定可用于胰腺疾病诊断，特别是在急性胰腺炎时，发病后4～8h内血清脂肪酶活性升高，24h达峰值，一般持续8～14天。脂肪酶活性升高多与淀粉酶并行，但可能开始升高地时间更早、持续时间更长、升高的程度更大。有报告患急性胰腺炎时脂肪酶比淀粉酶更敏感和特异，因而认为脂肪酶活性升高更有诊断意义，最好是同时检测淀粉酶和脂肪酶。因脂肪酶活性升高持续的时间较长，所以在疾病的后期测定可能更有意义。
此外血清脂肪酶升高也可见于急腹症、慢性肾病等，但患腮腺炎和巨淀粉酶血症时不升高，此点与淀粉酶不同，可用于鉴别。
测定脂肪酶可用橄榄油或三油酸甘油酯做底物，脂肪酶只作用在脂-水界面，因此，所用之底物必须呈乳胶状态，其反应速度将随乳状液之分散度(表面积)而增加。由胰腺分泌的共酯酶连于胆酸盐表面，形成共酯酶-胆酸盐复合物，再附着于底物表面，这种形式的底物和脂肪酶有很高的亲和力。
虽然脂肪酶对急性胰腺炎诊断比较特异和灵敏，但以前由于方法学问题，未得到临床普遍应用。现已有试剂盒供应，有利于临床推广应用。